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斜面的制备步骤?
斜面的制备步骤?
PDA培养基的配制及试管斜面制作
1.实验材料
1.1试剂材料
土豆,葡萄糖,琼脂,试管,试管架,天平,注射用硫酸链霉素,注射用青霉素钠,三角瓶,灭菌锅,电磁炉,超净工作台,烧杯,1mL移液器,培养皿
1.2PDA培养基配方
土豆(去皮)200g
葡萄糖20g
琼脂15-20g
蒸馏水1000mL
pH 自然
2.实验方法与步骤
2.1称量和熬煮
将土豆去皮,按自己所需的量(例如配制1L)称取土豆,将土豆切成小块放入锅内,加入适量的蒸馏水,在电磁炉上加热至沸腾,30min后用4层纱布在大量杯上过滤,弃掉滤渣,滤液用蒸馏水补足1L。
2.2溶解
用天平称取20g葡萄糖加入滤液中,用玻璃棒搅拌,使其完全溶解。
2.3分装
称取8-10g琼脂,加入所用三角瓶中,然后将滤液分装到三角瓶中,每瓶500mL,用玻璃棒将琼脂搅匀。
2.4加棉塞
培养基分装完毕后,在三角瓶口上塞上棉塞,以阻止外界微生物进入培养基内造成污染,并保证有良好的通气性。
2.5包扎
加塞后,在棉塞外用两层报纸包裹,其外用橡皮筋包扎好,标记。
2.6灭菌
将配制完成的培养基,包好的平板及其他所需用品一起放入灭菌锅灭菌(见灭菌锅使用方法)。
3.试管斜面制作方法与步骤
3.1前两步同2.1,2.1步骤
3.2加热溶解
量取500mL滤液到1000mL的烧杯中,再加入8-10g的琼脂,用玻璃棒搅匀,放入微波炉缓慢加热溶解,加热其间注意不要让培养基溢出烧杯,不时用玻璃棒搅拌。
3.3分装
等琼脂溶解后,将培养基分装到事先准备好的试管中。分装量约占试管高度的1/4,管口尽量不要沾染培养基。
3.4加塞
培养基分装完毕后,在试管口上塞上棉塞或橡胶塞,以阻止外界微生物进入培养基内造成污染,并保证有良好的通气性。
3.5包扎
加塞后,试管7-9支捆用橡皮筋捆好,在塞外用两层报纸包裹,其外用橡皮筋包扎好,标记。
3.6灭菌
将包好的试管和其他所需灭菌物品一同放入灭菌锅灭菌。
3.7摆斜面
灭菌完成后,将试管拿出,在超净工作台下摆成斜面,根据自己需要选择合适的倾斜度。
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那得买专门有支撑架的外壳,这样就可以支撑了